ELISA實驗操作人員經(jīng)常會遇到自己的檢測數(shù)據(jù)和相關(guān)文獻中的實驗結(jié)果差別較大，甚至相反，或與預期不一致的情況，也常常為此感到困惑。今天給大家分享的內(nèi)容：哪些錯誤的操作能造成ELISA實驗結(jié)果成假陽性。

ELISA實驗中造成假陽性的錯誤操作主要有如下幾點：
1、加樣
   對于間接ELISA標本一般都要進行稀釋，如果加樣不準就會造成誤差，尤其當稀釋倍數(shù)大時，很小的誤差，會導致較大的相對誤差，使陰性（或弱陽性）標本呈陽性（或陰性）。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。目前，大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統(tǒng)處理標本，可較好地避免以上誤差。
2、洗滌
   在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復結(jié)果的關(guān)健一步，應引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作，得出不正確的結(jié)果常與不正確的洗滌有關(guān)，ELISA就是靠洗滌來達到分離游離和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
3、 溫育
    每種試劑都有其zui合適的反應模式，其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高，反應時間長，會造成整板本底高，陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴，反應板不宜疊放，以保證各板溫度都能迅速平衡，為避免蒸發(fā)，板上應加蓋。
4、酶標儀判讀
   作為記錄測定結(jié)果的儀器，酶標儀的性能穩(wěn)定與否，決定結(jié)果的可靠度。首先酶標儀應定期進行保養(yǎng)，對濾光片要定期校正；其次酶標儀波長設(shè)置要正確，使用雙波長，一個檢測波長，一個參比波長，以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外，在用酶標儀讀數(shù)時先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標儀性能有所不同，使用中應詳細閱讀說明書
                                        

    綜上所述，在ELISA結(jié)果成陽性的時候，應綜合考慮操作因素，標本因素和試劑因素等多方面進行分析，我司采用進口材料生產(chǎn)，專業(yè)的酶免專家，提供免費代測，數(shù)據(jù)分析，技術(shù)服務。產(chǎn)品遠銷全國各地。多年以來我們以極其苛刻的要求控制產(chǎn)品的質(zhì)量，堅持生物科學研究與世界同步的理念。因此也得到了全國各大醫(yī)院院校、*醫(yī)院、研究所，科研機構(gòu)等單位的一致認可，并發(fā)表了多篇文獻。咨詢訂購！